一文為大家介紹純化柱的正確維護(hù)方法
點(diǎn)擊次數(shù):2335 更新時(shí)間:2021-08-20
純化柱采用硅膠膜作為核酸的特異性吸附材料,而對(duì)其他生物材料基本不吸附,可以保障大程度地回收樣品中的DNA\RNA,同時(shí)去除其他雜質(zhì)??梢杂糜诟鞣N材料的DNA\RNA的提取以及精制,具有操作簡(jiǎn)單、回收率高、性能穩(wěn)定等特點(diǎn)。
下面咱們來(lái)了解下純化柱的正確維護(hù)方法:
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使其從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況。柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。
2、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
3、一般說(shuō)來(lái)不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
5、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和本產(chǎn)品之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
6、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
7、保存時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
8、使用過(guò)程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭被污染。如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。